色譜層析柱應(yīng)該如何確定上樣量
更新時(shí)間：2020-07-29 點(diǎn)擊次數(shù)：1337次
色譜層析柱產(chǎn)品專為生物色譜開發(fā)，兩端可調(diào)活塞支持了經(jīng)典正相和反相色譜轉(zhuǎn)向生物色譜的應(yīng)用。通過(guò)快速緊鎖式系統(tǒng)能迅速的對(duì)柱進(jìn)行打開和裝填密封，也能方便的拆卸進(jìn)行零部件清洗。通過(guò)使用SP系列色譜柱，可以在藥物研發(fā)的早期階段更快、更簡(jiǎn)便地評(píng)估各種填料性并獲取必要的放大數(shù)據(jù)。
在做層析實(shí)驗(yàn)的時(shí)候可能時(shí)常會(huì)遇到一個(gè)問(wèn)題：一次實(shí)驗(yàn)可以上多少樣品呢？多也不是少也不是，上樣多了會(huì)造成一部分樣品損失或者達(dá)不到預(yù)期的分離效果，上樣少了無(wú)法充分使用色譜層析柱還要增加重復(fù)實(shí)驗(yàn)或者使用更大層析柱，真是件糾結(jié)的事情。我們今天要來(lái)給大家介紹的就是不同的色譜層析柱應(yīng)該如何確定上樣量。
色譜層析柱樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，直徑大于2厘米，但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外，直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)，但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞，一般不超過(guò)1米。
此外，直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)，但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞，一般不超過(guò)1米。
分族分離時(shí)用短柱，一般凝膠柱長(zhǎng)20-30厘米，柱高與直徑的比較5:1─10:1，凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1，常用凝膠柱有50×25厘米，10×25厘米。
